Content

• Per trepitjar
• Part 1 de 2: Comprovació del calibratge
• Part 2 de 2: càlcul dels resultats

Una pipeta és un tipus d'equip de laboratori que s'utilitza per mesurar i transferir quantitats molt petites de líquid. La precisió i la precisió en el mesurament de les pipetes són necessàries perquè qualsevol desviació en els volums lliurats pot afectar els resultats d’un experiment. Per garantir la precisió, cal comprovar el calibratge de la pipeta cada pocs mesos. El procés de calibratge ajuda a verificar que l’equip distribueix els volums correctes perquè es pugui restaurar si no ho és.

Per trepitjar

Part 1 de 2: Comprovació del calibratge

1. Reuneix els materials necessaris. Per comprovar el calibratge d’una pipeta, necessiteu una pipeta, puntes de pipeta, aigua destil·lada, un vas de precipitats, termòmetre, una balança i plats. La balança ha de ser específica per microgramar per calibrar micropipetes amb un màxim d'1 µl.
   • No necessiteu més de 5 ml d’aigua. Ompliu la tassa amb l’aigua.
   • Assegureu-vos que les puntes de la pipeta encaixin correctament.
2. Mesureu la temperatura de l’aigua destil·lada. Col·loqueu el termòmetre a l’aigua i deixeu-lo reposar almenys un minut. Si la línia vermella del termòmetre encara es mou, deixeu-la un minut més. Al cap d’un minut, anoteu la temperatura en un quadern. Traieu el termòmetre i sequeu-lo quan hàgiu acabat.
   • La temperatura de l’aigua és important per als càlculs fets per comprovar el calibratge.
3. Col·loqueu l’escala a la balança i ajusteu-la a zero. L’ideal seria utilitzar una balança amb portes i una habitació aïllada. Col·loqueu el bol a l’habitació i tanqueu les portes. Si no hi ha portes, poseu el bol sobre la balança. Premeu el botó "Zero" o "Tara" i espereu que el saldo es mostri a zero.
   • En posar el balanç a zero, no es té en compte el pes del bol de plàstic i es pot mesurar només el pes del que poseu al bol.
4. Prepareu la pipeta per al calibratge. Abans de començar, netegeu la pipeta amb etanol per acabar amb qualsevol contaminant; a més, assegureu-vos que la punta de la pipeta no s’obstrueixi. Col·loqueu la punta correcta al final i configureu el volum que voleu provar.
   • Abans del calibratge, proveu tant el volum més petit com el volum més gran que pot dispensar la pipeta.
5. Esbandiu la punta abans de calibrar-la. Premeu el botó fins a la primera parada i introduïu la punta a l’aigua destil·lada de manera que uns 2 mm d’aquesta quedi submergida al líquid. Deixeu anar el botó per treure una mica de líquid i, a continuació, torneu a dispensar-lo prement el botó cap avall. Repetiu-ho tres vegades per rentar la punta.
   • Premeu el botó fins a la segona parada per dispensar qualsevol líquid que quedi a la punta i traieu la pipeta de l’aigua.
6. Traieu el volum de calibratge. Amb la punta fora del líquid, premeu el botó cap avall fins a la primera parada. Col·loqueu a uns 2 mm de la punta a l’aigua destil·lada i deixeu anar el botó per treure el líquid a la punta. Espereu aproximadament un segon abans de treure la punta de l’aigua.
   • Assegureu-vos que la punta estigui completament submergida durant tot el procés d’aspiració. No voleu bombolles a la punta o el resultat no serà correcte.
7. Dosi el líquid al bol sobre la balança. Col·loqueu la punta contra el fons del bol i premeu el botó cap avall fins a la primera parada. Desplaceu-vos a un altre lloc, lleugerament allunyat de l'aigua, i premeu el botó fins a la segona parada. Manteniu premut el botó i aixequeu la punta del bol.
   • Mantingueu la punta a la pipeta, perquè la tornareu a utilitzar per fer més proves de calibratge. Assegureu-vos que la punta no toca res.
8. Anoteu el pes que indica el saldo. Tanqueu la porta si utilitzeu una balança en una habitació aïllada. Espereu que els valors deixin de canviar. Anoteu aquest valor a la vostra llibreta.
   • És important esperar que el número s’estabilitzi abans d’escriure-ho. Les vostres lectures seran incorrectes si no espereu.
9. Repetiu aquest procés fins que hàgiu pres almenys 10 mesures. Ajusteu el saldo a zero, netegeu la punta, traieu el mateix volum, distribuïu el volum i, a continuació, anoteu el pes. Necessiteu diversos enregistraments del mateix volum i després podreu agafar la mitjana de tots els enregistraments.
   • Podeu repetir aquest mateix procés amb volums diferents, sempre que feu diverses mesures per volum.

Part 2 de 2: càlcul dels resultats

1. Utilitzeu la fórmula per al volum calculat. La fórmula per calcular el volum lliurat per la pipeta és V = w * Z, on w és el pes de l’aigua, Z és el factor de conversió basat en la densitat de l’aigua i V és el volum calculat de la quantitat d’aigua hi ha lliurat.
   • Podeu trobar la variable Z buscant la densitat de l’aigua mitjançant la temperatura registrada al començament de l’experiment.
   • Per exemple: si la temperatura de l'aigua era de 23 ° C, assumiu un valor Z d'1,0035 µg / mg.
2. Calculeu la mitjana dels assajos repetits. Heu d’haver pesat el volum d’aigua dispensat per la pipeta almenys 10 vegades. Per calcular la mitjana de tots aquests valors, sumeu-los i dividiu-los per 10. Si heu fet més o menys proves, afegiu cada prova i dividiu la suma pel nombre total de proves.
   • Per exemple: els deu pesos que heu registrat per a un volum de pipeta de 10 μl són els següents: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 i 9,98.
   • La mitjana és: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Apliqueu les variables a l’equació i resoleu-la. Un cop hàgiu determinat els valors correctes per a cada variable, podeu incorporar-los a l'equació i resoldre el volum calculat. Per resoldre-ho, simplement multipliqueu el pes mitjà de tots els valors de la prova pel valor Z.
   • Per exemple: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Calculeu la precisió de la pipeta. Per calcular la precisió podeu utilitzar l’equació A = 100 x V._mitjana/ V₀ on A és la precisió de la pipeta, V._mitjana el volum mitjà calculat i V.₀ el valor que heu definit per a la pipeta. La precisió ha d’estar entre el 99-101%.
   • Si la pipeta està calibrada correctament, el valor calculat hauria de ser molt proper al valor real que hàgiu definit a la pipeta.
   • Per exemple: A = 100 x V_mitjana/ V₀ = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.0019 = 100,19%
   • Aquesta pipeta està correctament calibrada.
5. Envieu la pipeta per calibrar-la, si cal. Si la pipeta falla la prova de calibratge, deixeu d'utilitzar-la immediatament per a experiments. Les pipetes són peces molt delicades i costoses dels equips de laboratori. No podeu reparar el calibratge vosaltres mateixos, de manera que l’haureu d’enviar per a un manteniment adequat. Com a alternativa, algunes empreses vindran al vostre laboratori i calibraran les pipetes allà.
   • Per al manteniment, poseu-vos en contacte amb l’empresa que fabrica la vostra marca de pipetes específica.